Uno de los órganos centrales del tracto gastrointestinal es el páncreas. Este desempeña una función activa en la regulación del sistema digestivo, ya que secreta enzimas que hidrolizan a proteínas, lípidos y carbohidratos provenientes del alimento (Kuzmina et al. 2024). Con respecto a la cría de aves de corral, en la literatura científica se informan investigaciones que permiten demostrar la adaptación de las glándulas digestivas de los animales a la composición química de los alimentos (Vertiprakhov et al. 2023).

En estudios realizados por Martínez-Pérez et al. (2021), donde se incluyó harina de palmiche en la alimentación de pollos de ceba, se demostró que la fracción proteica de este fruto se considera relativamente baja (8.77 %) y que los niveles de extracto etéreo son elevados (16.06 %). Vertiprakhov et al. (2020), al analizar diferentes fuentes de aceites vegetales en gallinas ponedoras, observaron que la función exocrina del páncreas se modifica según la fuente en estudio. El objetivo de este trabajo fue estudiar la actividad enzimática de tripsina pancreática en pollos de ceba que consumen harina de palmiche.

Se utilizaron 40 pollos de ceba machos del híbrido HE_21, con peso vivo inicial promedio de 141±5 g. Se alojaron en jaulas metálicas desde los 8 hasta los 42 d de edad. Las dietas experimentales consistieron en: control (maíz-torta de soya) y la inclusión de 5, 10 y 15 % de harina de palmiche, de manera que se mantuvieron isoproteicas e isoenergéticas. La formulación se realizó para las etapas de inicio, crecimiento y acabado y se informaron por Vives et al. (2020). Durante todo el tiempo de experimentación, los pollos tuvieron libre acceso al agua y al alimento.

A los 42 d, los pollos se pesaron y sacrificaron, exactamente dos horas y treinta minutos después de la ingestión del alimento. Se utilizaron procedimientos tradicionales: insensibilización por aturdimiento con choque eléctrico antes del método de desangrado por punción en la yugular. Posteriormente, se abrió la cavidad abdominal y se extrajeron los páncreas. Se pesaron en balanza técnica (SARTORIUS, Alemania) y se expresaron como relativos al peso vivo (g^.kg^-1 de PV). Luego, se sumergieron en 4 mL.g^-1 de solución salina fisiológica, entre 0 y 4 ºC, para su traslado al laboratorio. Los órganos de tres animales por tratamiento, que constituyeron una muestra, se homogeneizaron manualmente y se centrifugaron a 1500 r.p.m. durante 10 min a 4 ºC en una centrífuga refrigerada marca Thermoscientific IEC CL31R (China). Se descartó el pélet y se almacenó el sobrenadante en pequeñas alícuotas a -80 °C hasta posteriores análisis.

La concentración de proteínas se determinó mediante el método de Bradford (1976) en un espectrofotómetro UV-vis (Rigol serie Ultra-3400, China). El cálculo de las concentraciones se realizó mediante la interpolación de los valores de absorbancia de las muestras en la curva patrón de seroalbúmina bovina (BSA) (0.01-5 mg/mL). Esta se normalizó para todos los homogenados en estudio a 3 mg/mL, para lo que se realizaron las diluciones correspondientes en cada caso. Todos los análisis se realizaron por triplicado.

La actividad de la tripsina se determinó en el homogenizado de páncreas, según la técnica descrita por León et al. (2007). El mismo (0.3 mg de proteína) se incubó durante 15 min a 41 °C con 200 μL del sustrato caseína al 1 % en tampón fosfato de sodio 100 mM pH 7.4. La reacción se detuvo con la adición de 1 mL de ácido tricloroacético al 5 % p/v y la mezcla se filtró mediante papel Whatman 42. Se hicieron reaccionar 250 μL del filtrado con 1 250 μL de Na₂CO₃ 200 mM y 250 μL del reactivo de Folin-Ciocalteu, diluido 1:5 en agua destilada. Después de la incubación, durante 20 min a 41 °C, se midió la absorbancia a longitud de onda de 625 nm. Los valores se compararon con los de una curva estándar, elaborada a partir de una solución de tirosina (1 mg/mL). La actividad específica de la tripsina se expresó como mg de tirosina liberada^.min^-1.mg^-1 de proteína.

Se utilizó diseño completamente aleatorizado, con cuatro tratamientos. Para los pesos vivo final y relativo del páncreas, se utilizaron 10 repeticiones de un animal y para la actividad enzimática de la tripsina pancreática, tres repeticiones, que correspondieron a una muestra de tres páncreas cada una. Las diferencias entre las medias se determinaron según Duncan (1955) para p<0.05 en los casos necesarios. Se utilizó el paquete estadístico Infostat (Di Rienzo et al. 2012).

No se encontraron diferencias en los pesos vivo final y los relativos del páncreas entre los cuatro tratamientos (tabla 1). Similar comportamiento registraron Vives et al. (2021), al estudiar la glándula accesoria en pollos de ceba. Estos autores plantearon además, que aunque macroscópicamente no se observaron cambios morfométricos, hubo incremento de sus funciones específicas, ante la presencia de harina de palmiche en la ración, lo que favorece el proceso de digestión.

Tabla 1

Pesos	Inclusión de harina de palmiche, %				EE±	p-valor
	Control	5	10	15
Vivo final (kg)	2.24	2.36	2.34	2.15	0.15	0.7506
Páncreas (g.kg-1 de PV)	2.93	2.58	2.50	2.45	0.21	0.3910

Los tratamientos con la inclusión de 5 y 10 % de harina de palmiche no difirieron entre sí, y mostraron actividad enzimática mayor de la tripsina pancreática con respecto al resto (figura 1). El incremento representa un beneficio fisiológico para el animal, ya que según Vertiprakhov et al. (2023) esta enzima rompe los enlaces de las proteínas mediante hidrólisis para formar péptidos o aminoácidos de menor tamaño, más fácilmente digeribles y biodisponibles. De esta manera, aumenta la digestión de estas biomoléculas, que desempeñan funciones biológicas esenciales en el organismo: estructural, enzimática, hormonal, reguladora, homeostática, entre otras.

Figura 1 ^a,b Valores con distintas letras muestran diferencias significativas (p<0.05)

La reducción de la actividad enzimática del 15 % respecto al resto de los tratamientos que incluyen la harina de palmiche se puede relacionar con la alta correlación que demostraron Martínez-Pérez et al. (2021) entre los contenidos de grasa y fibra (86 %) que aporta el palmiche con este nivel en la dieta. Según Liu et al. (2017) los lípidos tienen mayor impacto en el consumo de alimento, que el almidón y las proteínas, y que las concentraciones de estas últimas, se diluyen mediante la inclusión de lípidos adicionales en el extracto etéreo de dietas isoenergéticas. Vertiprakhov et al. (2020) plantearon que ante concentraciones fisiológicas elevadas de grasa, se observa un incremento selectivo de la lipasa con disminución global del resto de la secreción enzimática. Este resultado concuerda con lo expresado por Vives et al. (2020), quienes observaron mayor actividad enzimática de la lipasa pancreática para 15 % de inclusión de harina de palmiche en la ración de pollos de ceba.

Se han descrito efectos inhibidores de la secreción pancreática exocrina por parte de nutrientes, sales biliares, algunas hormonas gastrointestinales e inhibidores de tripsina (Kuzmina et al. 2024). Según Singh y Kim (2021), la fibra aumenta la excreción de sales biliares, que son las encargadas de la emulsificación de los lípidos para que ocurra su digestión. Por lo tanto, este comportamiento también pudiera estar asociado a efectos inhibidores por parte de la fracción fibrosa del palmiche. Pudiera ser que con 15 % de harina de palmiche en la dieta aumentaran las concentraciones de inhibidores de tripsina, los que reducirían la actividad de la tripsina. Se necesita confirmar esta hipótesis con estudios posteriores.

Se concluye que la inclusión de hasta 10 % de harina de palmiche en la dieta de pollos de ceba aumenta la actividad de la enzima tripsina pancreática en el tracto gastrointestinal.