Materials and Methods

Reseach area, climate and soil. The study was carried out in areas of the Departamento Docente-Productivo from Universidad de Granma, in the southeastern of Cuba, Granma province, at 17.5 km from Bayamo city. Studies during two years (2014-2015) were performed and two seasons were considered, the rainy season (May-October) and dry season (November-April).

The soil in the area was calcic haptustept (Soil Survey Staff 2014Soil Survey Staff. 2014. Keys to soil taxonomy, 12th ed. United States Department of Agriculture Natural Resources Conservation Service, Washington, United States. ISBN: 978-1-4296-8745-4. https://www.nrcs.usda.gov/wps/portal/nrcs/detail/soils/survey/class/taxonomy/?cid=nrcs142p2_053580.), with a pH of 6.2. The content of P2O5, K2O and total N was 2.4; 33.42 and 3 mg/100g of soil, respectively and 3.6 % of organic matter.

During the rainy season, the rainfalls were of 731.4 mm; the mean, minimum and maximum temperature recorded values of 26.73; 22.31 and 33.92 ºC, respectively and the relative humidity was of 80.78; 51.02 and 96.22 %, for the mean, minimum and maximum, respectively. In the dry season, rainfalls reached values of 270 mm; the temperature was of 24.05; 18.29 and 31.58 ºC for the mean, minimum and maximum, respectively and the minimum, mean and maximum relative humidity with averages of 76.21; 44.16 and 97.03 %, respectively. Values that correspond with the historical performance for the area.

Treatment and experimental design. A random block design with for replications (plots) was used, considering as treatments the regrowth ages 60, 120 and 180 days.

Procedure. For the established species (T. diversifolia) at the beginning of each seasonal period a homogeneity cut at 15 cm soil height was performed. The samplings in each plot (0.5 ha) were carried out taking 10 random plants eliminating the first and the last plant of the plot in order to avoid the border effect. The sample was homogenized and weighed. Later, was manually separated in leaves, petioles and steams, these last with diameter inferior to two cm considering all edible biomass. Later a kilogram per each of the treatments was taken for the laboratory analysis. During the experimental stage irrigation and fertilization was not applied.

Chemical analysis. The samples were dried at room temperature in dark and ventilate room for 12 days. Later, a total of 300g were milled to a particle size of 1mm for each repetition. They were stored in amber bottles at room temperature until their analysis.

It was determined: dry matter (DM) and nitrogenous (N) in accordance with the AOAC (2016)AOAC, G. W. 2016. Official methods of analysis of AOAC International. 20th ed., Rockville, MD: AOAC International, ISBN: 978-0-935584-87-5, Available: http://www.directtextbook.com/isbn/9780935584875&gt. [Consulted: September 22, 2016]., while the contents of glucose, fructose and sucrose according the qualified method of Lane and Eynon, which is base on the reduction of Cu ⁺² a Cu ⁺¹ by the reducing sugars, using methyl blue as indicator (AOAC 2016AOAC, G. W. 2016. Official methods of analysis of AOAC International. 20th ed., Rockville, MD: AOAC International, ISBN: 978-0-935584-87-5, Available: http://www.directtextbook.com/isbn/9780935584875&gt. [Consulted: September 22, 2016].).

Statistical analysis and calculations. The Kolmogorov-Smirnov tests were performed for the normal distribution of data (Massey 1951Massey, F.J. 1951. "The Kolmogorov-Smirnov test for goodness of fit". Journal of the American Statistical Association. 4(543): 68-78. ISSN: 0162-1459. DOI: https://dx.doi.org/10.2307/2280095.), homogeneity of variances (Bartlett 1937Bartlett, M. 1937. "Properties of sufficiency and statistical tests". Proceedings of the Royal Society of London. Serie A 160(2): 268-282. ISSN:1467-985X DOI: https://doi.org/10.1098/rspa.1937.0109.), as well as the analysis of variance (ANOVA) of double classification and means comparison according to Duncan (1955)Duncan, D.B. 1955. "Multiple range and multiple F test". Biometrics. 11(1): 1-42. ISBN-: ‎ 1475782950. DOI: https://doi.org/10.2307/3001478.. To establish the functional relation between sugars and age, the regression equations (linear, quadratic, cubic, logarithmic and Gompertz) were analyzed and the descending method was used. For the choice of the better expression and their goodness of fit the Guerra et al. (2003)Guerra, C. W., Cabrera, A. & Fernández, L. 2003. “Criteria for the selection of statistical models in scientific research”. Cuban Journal of Agricultural Science, 37(1): 3-10, ISSN: 2079-3480 criteria related with the high value of the determination coefficient (R2), high significant of the expression and its parameters, low standard errors of the expression and its parameters, residue analysis and concordance test between the observed and estimated values were taken into account.

The correlation coefficients (Visauta 2007Visauta, V. B. 2007. Análisis estadístico con SPSS 14: estadística básica. Madrid, España: McGraw-Hilll Interamericana, 281 p., ISBN: 978-84-481-5670-1.) were established between primary metabolites (nitrogen, glucose, sucrose and fructose) with the age and climatic factors. For all the above, the statistic program SPSS version 22.0 (IBM 2015IBM. (2015). SPSS. SPSS Statistics for Windows, version 22. 0 (SPSS Inc., Chicago, ILL., USA)'. Retrieved October 2, 2016, from http://www-03.ibm.com/software/products/en/spss-statistics ) was used.

Results

The contents of nitrogen, glucose, sucrose and fructose in T. diversifica decreased with the regrowth age in 13.15, 0.008, 0.015 and 0.007 g.kg^-1 in the rainy season; while, for the dry season were of 17.39, 0.002, 0.003 and 0.0009 g.kg^-1, respectively (table 1).

Quadratic equations were fitted for all the indicators. All the regression coefficients were higher to 0.95 for all metabolites in both seasonal periods except for sucrose and fructose during the dry season that was 0.93 and 0.91, respectively (table 2).

The correlations between sugars and nitrogen (primary compounds) with the climate factors were changeable (table 3). During the rainy season the higher coefficient (r) values were for sucrose with the rainy days and maximum temperature (-0.92 and -0.69, respectively); nitrogen with minimum, mean temperature and rainy days (-0.47, -0.46 and -0.87, respectively); glucose with minimum, mean temperature and rainy days (-0.65, -0.65 and -0.69, respectively) and fructose with the minimum relative humidity and rainy days (-0.88, -0.46 and -0.68, respectively) it is important to highlighted that the rainy days were related with all the indicators. In the dry season only the N correlated with the minimum and mean temperature, the mean, maximum, minimum relative humidity, total rainfalls and rainy days(-0.68, -0.72, -0.65, -0.65, 0.76 and -0.94, respectively) and fructose with mean, maximum temperature and total rainfalls (0.65, -0.59 and 0.58, respectively.

Discussion

The reduction of primary metabolites (table 1) has been described by Salas et al. (2015)Salas, R., Ordoñez, E. & Reátegui, D. 2015. "Polifenoles totales y capacidad antioxidante (DPPH y ABTS) en cuatro variedades de frejol (Phaseolus vulgaris l.) crudo seco, remojado y cocido". Investigación y Amazonía. 5(1 y 2): 55-62. ISSN: 2224-445X. https://revistas.unas.edu.pe/index.php/revia/article/view/59/46., Méndez et al. (2018)Méndez, Y., Suárez, F.O., Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Labrada, J.A., Murillo, B. & Ramírez, J.L. 2018. "Bromatological characterization of Moringa oleifera foliage in different development stages". Cuban Journal of Agricultural Science. 52(3): 1-10. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/809. and Paumier et al. (2018)Paumier, M., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Leonard, I., Santana, A. & Méndez, Y. 2018. "El contenido de metabolitos primarios de Gliricidia sepium en una zona del Valle del Cauto, Cuba". REDVET Revista Electrónica de Veterinaria. 19(4): 1-8. ISSN 1695-7504. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040418.pdf., whose found in Phaseolus vulgaris, Moringa oleifera y Gliricidia sepium that values of carbohydrates and nitrogenous compounds were closely related with the succession of phenological events, from the early growth up to the flowers formation and flowering. From the last one, the general decrease of sugars and protein compounds begin, since the performance of energy metabolites in accordance to the morpho- structural variations depends on the species, nutritional state and edaphoclimatic conditions in which it is cultivate.

The obtained models and the higher values of R2 reported in table 2 are similar to those informed by Herrera et al. (2017aHerrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017a. "Secondary metabolites of Leucaena leucocephala. Their relationship with some climate elements, different expressions of digestibility and primary metabolites". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (1): 107-116. ISSN: 2079-3480. http://cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/690. b)Herrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017b. "Relation between some climatic factors and the chemical composition of Tithonia diversifolia". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (2): 1-9. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/719., Paumier et al. (2018)Paumier, M., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Leonard, I., Santana, A. & Méndez, Y. 2018. "El contenido de metabolitos primarios de Gliricidia sepium en una zona del Valle del Cauto, Cuba". REDVET Revista Electrónica de Veterinaria. 19(4): 1-8. ISSN 1695-7504. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040418.pdf. and Verdecia et al. (2018)Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Ramírez, J.L., Bodas, R., Leonard, I., Giráldez, F.J., Andrés, S., Santana, A., Méndez-Martínez, Y. & López, S. 2018. "Yield components, chemical characterization and polyphenolic profile of Tithonia diversifolia in Valle del Cauto, Cuba". Cuban Journal of Agricultural Science. 52(4): 457-471. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/838., when evaluating the age effect and climatic factors in the nitrogen content in forage species in Valle del Cauto. They associate the N decrease with the cut frequency due to the reduction of the protein compounds synthesis, the decrease of the amount of leaves, increase of the fraction stems and increase of the structural carbohydrates synthesis (cellulose and hemicellulose) and phenolic compounds (lignin).

Other authors as Torres-Navarrete et al. (2019)Torres-Navarrete, E., Sánchez-Laiño, A., Espinoza-Guerra, I., Barrera-Álvarez, A., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L. & Herrera, R.S. 2019. "Productivity, chemical composition and in situ ruminal degradation kinetics of Morus alba at different regrowth ages". Cuban Journal of Agricultural Science. 53(4): 447-457. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/924., associate this performance with the high proportion of stems in the sample, since, usually, in the literature are reported N values of approximately 33.6 g/kg DM in leaves, while in the stems range between 11.2 and 22 g/kg DM. Generally, the observed values in the analyzed plants are similar to those of the temperate legumes. The founded contents are in the range established by Camacho-Escobar et al. (2020)Camacho-Escobar, M.A., Ramos-Ramos, D.A., Ávila-Serrano, N.Y., Sánchez-Bernal, E.I. & López-Garrido, S.J. 2020. "Las defensas físico-químicas de las plantas y su efecto en la alimentación de los rumiantes". Terra Latinoamericana. 38(2): 443-453. ISSN: 1870-9982. DOI: https://doi.org/10.28940/terra.v38i2.629. for tropical legumes, given importance to the results of this study.

On the other hand, Rivera et al. (2018)Rivera, J.E., Chará, J., Gómez-Leyva, J.F., Ruíz, T. & Barahona, R. 2018. "Variabilidad fenotípica y composición fitoquímica de Tithonia diversifolia A. Gray para la producción animal sostenible". Livestock Research for Rural Development. 30 (12): 1-20. ISSN: 2521-9952. stated that T. diversifolia is a plant which is characterized of having excellent quality, due to its low fiber content and good relation of nutrients in their foliage, mainly high content of nitrogenous compounds in its first vegetative phase. Herrera et al. (2020)Herrera, R.S., Verdecia, D.M. & Ramírez, J.L. 2020. "Chemical composition, secondary and primary metabolites of Tithonia diversifolia related to climate". Cuban Journal of Agricultural Science. 54(3): 425-433. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/976. and Paumier et al. (2020)Paumier, M., Méndez-Martínez, Y., Torres, E., Sánchez, A.R., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Santana, A. & Verdecia, D.M. 2020. "Indicators of Yield of Tithonia diversifolia in the Zone of Granma Province, Cuba". Modern Concepts & Developments in Agronomy. 6(4): MCDA. 000645. ISSN: 2637-7659. DOI: https://doi.org/10.31031/MCDA.2020.06.000645., founded nitrogen concentrations of 26-46 g/kg of DM, while Verdecia et al. (2021)Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Ramírez, J.L., Leonard, I., Bodas, R., Andrés, S., Giráldez, F.J., Valdés, C., Arceo, Y., Paumier, M., Santana, A., Álvarez, Y., Méndez-Martínez, Y. & López S. 2020b. "Effect of age of regrowth, chemical composition and secondary metabolites on the digestibility of Leucaena leucocephala in the Cauto Valley, Cuba". Agroforestry Systems. 94(4): 1247-1253. ISSN: 0167-4366. DOI: https://doi.org/10.1007/s10457-018-0339-y. notified similarities regarding the content and nitrogen variability of T. diversifolia and G. sepium, emphasizing the importance of using the combination of legume forage species in animal feeding.

The trees quality varied in the different biomass components. Leaves has high nutrients concentrations than the branches and stems, and this variation has also related with the age, having the young leaves more nitrogen content than older leaves (Lodoño et al. 2018Londoño, J., Mahecha, L. & Angulo, J. 2018. "Desempeño agronómico y valor nutritivo de Tithonia diversifolia (Hemsl.) A Gray para la alimentación de bovinos". Revista Colombiana de Ciencia Animal. 11(1): 1-13. ISSN: 2027-4297. DOI: https://doi.org/10.24188/recia.v0.n0.2019.693.). These results coincide with those reported for this species (Gallego-Castro et al. 2017Gallego-Castro, L.A., Mahecha-Ledesma, L. & Angulo-Arizala, J. 2017. "Calidad nutricional de Tithonia diversifolia Hemsl. A gray bajo tres sistemas de siembra en el trópico alto". Agron. Mesoam. 28(1):213-222. ISBN: 978-607-7953-80-7 DOI: https://doi.org/10.15517/am.v28i1.21671., Cerdas-Ramírez 2018Cerdas-Ramírez, R. 2018. "Extracción de nutrientes y productividad del botón de oro (Tithonia diversifolia) con varias dosis de fertilización nitrogenada". InterSedes. 39(19):172-187. ISBN 3-926446-66-8. DOI: https://doi.org/10.15517/isucr.v19i39. and Rodríguez et al. 2019Rodríguez, R., Galindo, J., Ruiz, T.E., Solis, C., Scull, I. & Gómez, S. 2019. "Valor nutritivo de siete ecotipos de Tithonia diversifolia colectados en la zona oriental de Cuba". Livestock Research for Rural Development. 31(8). ISSN: 2521-9952. http://lrrd.cipav.org.co/lrrd31/8/ruiz31119.html.).

The variability in the sugars with the age is due to the differentiated photosynthetic capacity of each species, related with the content of minerals and potassium, which is the mediator of metabolism and of the primary carbohydrates transport in the plant (Martín 2017Martín, D.A. 2017. "Los compuestos fenólicos: un acercamiento a su biosíntesis, síntesis y actividad biológica". Revista de Investigación Agraria y Ambiental. 9(1):81-104. ISSN: 2145-6453. DOI: https://doi.org/10.22490/21456453.1968.).

The content of soluble carbohydrates is link to the morpho-structural development of plants. The concentrated reserves of these compounds, in fewer amounts, in the growing points (buds) favor the leaves concentrations of saccharides after the regrowth emission. However, although in general way these aspects are described, from the physiological point of view, the performance of energetic metabolites in function of morphologic variations depends on the species, nutritional state and edaphoclimatic conditions in which it is cultivated (Cao et al. 2011Cao, H., Hwang, J. & Chen, X. 2011. "Carbohydrate-containing natural products in medicinal chemistry. Opportunity, challenge and scope of natural products in Medicinal Chemistry". Chem. Inform. 44(23): 411-431. ISSN:1522-2667. DOI: https://doi.org/10.1002/CHIN.201323203.).

Li et al. (2018)Li, M., Li, P., Ma, F., Dandekar, A.M. & Cheng, L. 2018. "Sugar metabolism and accumulation in the fruit of transgenic apple trees with decreased sorbitol synthesis". Horticulture Research. 5(60): 1-11. ISSN 2052-7276. DOI: https://doi.org/10.1038/s41438-018-0064-8. when refering to the carbohydrates movement stated, that reserve content reach it higher value in the old leaves at the beginning of the flowering and were moving during the fruit development but, observed the faster decrease of reserves in roots and leaves during the flowering, with a transitional increase of them at the beginning of the abscission of fruits and marked decrease up to a lower value at the end of the physiological abscission period, with which the fruit nutrition depends on the photosynthesis than of the tree reserves. Aspects that can explain what occur in this research.

The fluctuations of the non structural carbohydrates of E. variegata at the ages of 60 and 120 days found by Verdecia et al. (2020a)Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Ramírez, J.L., Paumier, M., Bodas, R., Andrés, S., Giráldez, F.J., Valdés, C., Arceo, Y., Álvarez, Y., Méndez-Martínez, Y. & López, S. 2020a. "Erythrina variegata quality in the Cauto Valley, Cuba". Agroforestry Systems. 94(4): 1209-1218. ISSN: 0167-4366. DOI: https://doi.org/10.1007/s10457-019-00353-z were attributed to genetic factors, edaphoclimatic conditions and the used cultivation techniques. The plant maturity, the transport and storing conditions, are important when evaluating the carbohydrates content, if it taking into account that the fructose is synthesized during the first growing stages. The sugars concentrations in Tithonia were similar to those obtained in the foliage of other non- legumes plants like Morus alba, Trichantera gigantea, Cnidoscolum aconitifolium and Ficus carica (García et al. 2008García, D.E., Medina, M.G., Clavero, T., Cova, L.J., Domínguez, C. & Baldizán, A. 2008. "Caracterización nutritiva del follaje de seis especies forrajeras con énfasis en sus perfiles polifenólicos". Revista Científica FCV-LUZ 18(3): 188-196. ISSN: 0798-2259. http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-22592008000200011.). However, the amounts were lower to that informed in some legumes of traditional use as forage (Yang et al. 2018Yang, L., Kui-Shan, W., Xiao, R., Ying-Xian, Z., Feng, W. & Qiang, W. 2018. "Response of Plant Secondary Metabolites to Environmental Factors". Molecules. 23(762): 1-26. ISSN: 1420-3049. DOI: https://doi.org/10.3390/molecules23040762.), in which the value of these compounds in mature foliage has been determined. These confirm the above described, where the intervention of different factors in the content of those sugars is explained.

On this matter, it is known that generally the non- legumes compared with legumes has higher amount of soluble carbohydrates when both groups are in the same phenological state (Flores-Villa et al. 2020Flores-Villa, E., Sáenz-Galindo, A., Castañeda-Facio, A.O. & Narro-Céspedes, R.I. 2020. "Romero (Rosmarinus officinalis L.): su origen, importancia y generalidades de sus metabolitos secundarios". TIP Revista Especializada en Ciencias Químico-Biológicas. 23: 1-17. ISSN: 2395-8723. DOI: https://doi.org/10.22201/fesz.23958723e.2020.0.266.). However, it has been showed in different experimental conditions, that the biomass age influence on the concentration of carbon hydrates (Guerreiro et al. 2018Guerriero, G., Berni, R., Muñoz-Sanchez, A., Apone, F., Abdel-Salam, E.M., Qahtan, A.A., Alatar, A.A., Cantini, C., Cai, G., Hausman, J.F., Siddiqui, K.S., Hernández-Sotomayor, T. & Faisal, M. 2018. "Production of Plant Secondary Metabolites: Examples, Tips and Suggestions for Biotechnologists". Genes. 9(309):1-15. ISSN: 2073-4425. DOI: https://doi.org/10.3390/genes9060309.).

Salvucci et al. (2010)Salvucci, M.E., Berta, C., Byers, J.A. & Canarini, A. 2010. "Photosynthesis and assimilate partitioning between carbohydrates and isoprenoid products in vegetatively active and dormant guayule: physiological and environmental constraints on rubber accumulation in a semiarid shrub". Physiology Plantarum. 140(4): 368-379. ISSN:1399-3054. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1399-3054.2010.01409.x. when studied the content of glucose, fructose and sucrose in Parthenium argentatum foliage found the higher concentrations during the rainy season, due to the higher photosynthetic activity and consequently increase of carbohydrates formation. Brueckner et al. (2010)Brueckner, B., Schwarzbach, A. & Schrödter, R. 2010. "Correlation between sugar and saponin contents and sensory attributes of white asparagus". J. Verbr. Lebnsm. 5: 305-311. ISBN 978-607-17-0414-6. DOI: https://doi.org/10.1007/s00003-010-0595-x. found 0.09 - 0.11; 0.15 - 0.16 and 0.03 - 0.04 g/kg DM of glucose, fructose and sucrose, respectively, values higher than those reported in this study. This could be attributed to the differences in the experimental conditions and of species.

Regarding the correlation between nitrogen, glucose, sucrose and fructose with the age and climatic factors (table 3), the results coincide with those found by Herrera et al. (2017 aHerrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017a. "Secondary metabolites of Leucaena leucocephala. Their relationship with some climate elements, different expressions of digestibility and primary metabolites". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (1): 107-116. ISSN: 2079-3480. http://cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/690. b)Herrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017b. "Relation between some climatic factors and the chemical composition of Tithonia diversifolia". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (2): 1-9. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/719., Paumier et al. (2018Paumier, M., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Leonard, I., Santana, A. & Méndez, Y. 2018. "El contenido de metabolitos primarios de Gliricidia sepium en una zona del Valle del Cauto, Cuba". REDVET Revista Electrónica de Veterinaria. 19(4): 1-8. ISSN 1695-7504. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040418.pdf.) and Herrera et al. (2020)Herrera, R.S., Verdecia, D.M. & Ramírez, J.L. 2020. "Chemical composition, secondary and primary metabolites of Tithonia diversifolia related to climate". Cuban Journal of Agricultural Science. 54(3): 425-433. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/976. who founded higher correlation coefficients (r) between regrowth age, total rainfalls and rainy days with the nitrogen and sugars.

In this sense, Hernández-Espinoza et al. (2020)Hernández-Espinoza, D.F., Lagunes-Espinoza, L.C., López-Herrera, M.A., Ramos-Juárez, J.A., González-Garduño, R. & Oliva-Hernández, J. 2020. Edad de rebrote de Erythrina americana Miller y concentración de compuestos fenólicos en el follaje. Madera y Bosques. 26(1): e2611826. https://doi.org/10.21829/myb.2020.2611826. explained that the stress produced by abiotics factors affects the kinetic of carbohydrates metabolism, in a way that the balance of environmental factors influence on the source-utilization relation and, therefore the final accumulation of this compounds in the storage organs. Hence, that in the improvement process of the different species and genotypes selection had been taking into account that these can endure the exigencies caused by the adverse abiotics conditions , for that, the fit capacity or tolerance of plants to this conditions don’t be limited.

Herrera et al. (2017a)Herrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017a. "Secondary metabolites of Leucaena leucocephala. Their relationship with some climate elements, different expressions of digestibility and primary metabolites". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (1): 107-116. ISSN: 2079-3480. http://cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/690. when correlate the chemical composition and climatic variables in this species established some hypothesis: a) all seems to be that the changes in the chemical composition are less sensitive to temperature variations; b) it is more important the rainfalls distribution than the total of them in the variability of chemical composition. In addition if these results are compared with those obtained in meadow grasses, as well as those reached in Leucaena are totally different. (Herrera et al. 2017 bHerrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017b. "Relation between some climatic factors and the chemical composition of Tithonia diversifolia". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (2): 1-9. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/719.), so it could be established the third hypothesis that are variations in the intensity and elements which intervene in the synthesis of the mentioned compounds. As hypothesis those needs specific researchers which explain this performance.

Conclusions

The regrowth age had marked effect on the primary metabolites content (nitrogen, glucose, fructose and sucrose) which explain the close relation, thorough the established regression equations. Regarding climatic factors the correlations were changeable as being marked during the rainy season, while in the dry season only nitrogen and fructose were related. This maintains that the higher variability and mobility of the main primary metabolites is due to the plant physiological processes.

Materiales y Métodos

Área de investigación, clima y suelo. El estudio se desarrolló en áreas del Departamento Docente-Productivo de la Universidad de Granma, al sureste de Cuba, en la provincia de Granma, a 17.5 km de la ciudad de Bayamo. Se realizaron estudios durante dos años (2014-2015) y se consideraron dos períodos, el lluvioso (mayo-octubre) y poco lluvioso (noviembre-abril).

El suelo presente en el área fue calcic haptustept (Soil Survey Staff 2014Soil Survey Staff. 2014. Keys to soil taxonomy, 12th ed. United States Department of Agriculture Natural Resources Conservation Service, Washington, United States. ISBN: 978-1-4296-8745-4. https://www.nrcs.usda.gov/wps/portal/nrcs/detail/soils/survey/class/taxonomy/?cid=nrcs142p2_053580.), con pH de 6.2. El contenido de P2O5, K2O y N total fue de 2.4; 33.42 y 3 mg/100g de suelo, respectivamente y 3.6% de materia orgánica.

Durante el período lluvioso, las precipitaciones fueron de 731.4 mm; la temperatura media, mínima y máxima registró valores de 26.73; 22.31 y 33.92 ºC, respectivamente y la humedad relativa fue de 80.78; 51.02 y 96.22 %, para la media, mínima y máxima, respectivamente. En el período de poco lluvioso, las precipitaciones alcanzaron valores de 270 mm; la temperatura fue de 24.05; 18.29 y 31.58 ºC para la media, mínima y máxima, respectivamente y la humedad relativa mínima, media y máxima con promedios de 76.21; 44.16 y 97.03 %, respectivamente. Valores que se corresponden con el comportamiento histórico para la región.

Tratamiento y diseño experimental. Se empleó un diseño en bloques al azar con cuatro réplicas (parcelas), considerándose como tratamientos las edades de rebrote de 60, 120 y 180 días.

Procedimiento. Para la especie ya establecida (T. diversifolia) al inicio de cada período estacional se realizó un corte de homogeneidad a 15 cm de altura del suelo. Los muestreos en cada parcela (0.5 ha) se realizaron tomando 10 plantas al azar eliminando la primera y la última de la parcela para evitar el efecto de borde. La muestra se homogenizó y pesó. Con posterioridad se separó, de forma manual, en hojas, peciolos y tallos, estos últimos con diámetro inferior a dos cm considerados todo lo anterior como biomasa comestible. Luego se tomó un kilogramo por cada uno de los tratamientos para los análisis en el laboratorio. Durante la etapa experimental no se aplicó riego ni fertilización.

Análisis químico. Las muestras se secaron a temperatura ambiente en un local oscuro y ventilado durante 12 días. Con posterioridad se molinaron 300 g para cada repetición hasta tamaño de partícula de un milímetro. Se almacenaron en frascos de color ámbar a temperatura ambiente hasta su análisis.

Se determinó: materia seca (MS) y nitrógeno (N) de acuerdo con la AOAC (2016)AOAC, G. W. 2016. Official methods of analysis of AOAC International. 20th ed., Rockville, MD: AOAC International, ISBN: 978-0-935584-87-5, Available: http://www.directtextbook.com/isbn/9780935584875&gt. [Consulted: September 22, 2016]., mientras que los contenidos de glucosa, fructosa y sacarosa según el método de titulación de Lane y Eynon, el cual se fundamenta en la reducción del Cu ⁺² a Cu ⁺¹ por los azúcares reductores, empleando como indicador azul de metileno (AOAC 2016AOAC, G. W. 2016. Official methods of analysis of AOAC International. 20th ed., Rockville, MD: AOAC International, ISBN: 978-0-935584-87-5, Available: http://www.directtextbook.com/isbn/9780935584875&gt. [Consulted: September 22, 2016].).

Análisis estadístico y cálculos. Se realizaron las pruebas de Kolmogorov-Smirnov para la distribución normal de los datos (Massey 1951Massey, F.J. 1951. "The Kolmogorov-Smirnov test for goodness of fit". Journal of the American Statistical Association. 4(543): 68-78. ISSN: 0162-1459. DOI: https://dx.doi.org/10.2307/2280095.), homogeneidad de las varianzas (Bartlett 1937Bartlett, M. 1937. "Properties of sufficiency and statistical tests". Proceedings of the Royal Society of London. Serie A 160(2): 268-282. ISSN:1467-985X DOI: https://doi.org/10.1098/rspa.1937.0109.), así como el análisis de varianza (ANOVA) de clasificación doble y comparación de medias según Duncan (1955)Duncan, D.B. 1955. "Multiple range and multiple F test". Biometrics. 11(1): 1-42. ISBN-: ‎ 1475782950. DOI: https://doi.org/10.2307/3001478.. Para establecer la relación funcional entre azúcares y edad, se analizaron las ecuaciones de regresión (lineales, cuadráticas, cúbicas, logarítmicas y Gompertz) y se utilizó el método descendente. Para la elección de la mejor expresión y su bondad de ajuste se tuvieron en cuenta los criterios de Guerra et al. (2003)Guerra, C. W., Cabrera, A. & Fernández, L. 2003. “Criteria for the selection of statistical models in scientific research”. Cuban Journal of Agricultural Science, 37(1): 3-10, ISSN: 2079-3480 relacionados con el alto valor del coeficiente de determinación (R2), alta significación de la expresión y sus parámetros, bajos errores estándar de la expresión y sus parámetros, análisis de residuos y prueba de concordancia entre los valores observados y estimados.

Se establecieron los coeficientes de correlación (Visauta 2007Visauta, V. B. 2007. Análisis estadístico con SPSS 14: estadística básica. Madrid, España: McGraw-Hilll Interamericana, 281 p., ISBN: 978-84-481-5670-1.) entre los metabolitos primarios (nitrógeno, glucosa, sacarosa y fructosa) con la edad y factores climáticos. Para todo esto se empleó el programa estadístico SPSS versión 22.0 (IBM 2015IBM. (2015). SPSS. SPSS Statistics for Windows, version 22. 0 (SPSS Inc., Chicago, ILL., USA)'. Retrieved October 2, 2016, from http://www-03.ibm.com/software/products/en/spss-statistics ).

Resultados

Los contenidos de nitrógeno, glucosa, sacarosa y fructosa en la T. diversifica disminuyeron con la edad de rebrote en 13.15, 0.008, 0.015 y 0.007 g.kg^-1 en el período lluvioso; mientras que, para el poco lluvioso fueron de 17.39, 0.002, 0.003 y 0.0009 g.kg^-1, respectivamente (tabla 1).

Se ajustaron ecuaciones cuadráticas para todos los indicadores. Todos los coeficientes de regresión fueron superiores a 0.95 para todos los metabolitos en ambos períodos estacionales excepto para sacarosa y fructosa durante el poco lluvioso que fue de 0.93 y 0.91 (tabla 2).

Las correlaciones entre los azúcares y nitrógeno (compuestos primarios) con los factores del clima fueron variables (tabla 3). Durante el período lluvioso los valores de coeficiente (r) superiores fueron para sacarosa con los días con lluvia y temperatura máxima (-0.92 y -0.69, respectivamente); nitrógeno con la temperatura mínima, media y días con lluvia (-0.47, -0.46 y -0.87, respectivamente); glucosa con temperatura mínima, media y días con lluvia ( -0.65, -0.65 y -0.69, respectivamente) y fructosa con la humedad relativa mínima, lluvias totales y días con lluvia (-0.88, -0.46 y -0.68, respectivamente), vale destacar que los días con lluvia se relacionaron con todos los indicadores. En el período poco lluvioso solo el N correlacionó con la temperatura mínima y media, la humedad relativa media, máxima, mínima, lluvias totales y días con lluvia ( -0.68, -0.72, -0.65, -0.65, 0.76 y -0.94, respectivamente) y la fructosa con temperatura máxima, media y lluvias totales (0.65, -0.59 y 0.58, respectivamente)

Discusión

La disminución de los metabolitos primarios (tabla 1) ha sido descrita por Salas et al. (2015)Salas, R., Ordoñez, E. & Reátegui, D. 2015. "Polifenoles totales y capacidad antioxidante (DPPH y ABTS) en cuatro variedades de frejol (Phaseolus vulgaris l.) crudo seco, remojado y cocido". Investigación y Amazonía. 5(1 y 2): 55-62. ISSN: 2224-445X. https://revistas.unas.edu.pe/index.php/revia/article/view/59/46., Méndez et al. (2018)Méndez, Y., Suárez, F.O., Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Labrada, J.A., Murillo, B. & Ramírez, J.L. 2018. "Bromatological characterization of Moringa oleifera foliage in different development stages". Cuban Journal of Agricultural Science. 52(3): 1-10. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/809. y Paumier et al. (2018)Paumier, M., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Leonard, I., Santana, A. & Méndez, Y. 2018. "El contenido de metabolitos primarios de Gliricidia sepium en una zona del Valle del Cauto, Cuba". REDVET Revista Electrónica de Veterinaria. 19(4): 1-8. ISSN 1695-7504. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040418.pdf., quienes en Phaseolus vulgaris, Moringa oleifera y Gliricidia sepium encontraron que los valores de carbohidratos y compuestos nitrogenados estaban estrechamente correlacionados con la sucesión de los eventos fenológicos, desde el crecimiento temprano hasta la formación de las flores y floración. A partir de este último, comenzó el decrecimiento general de los azúcares y compuestos proteicos, ya que el comportamiento de los metabolitos energéticos en correspondencia con las variaciones morfo-estructurales depende de la especie, estado nutricional y condiciones edafoclimáticas en la cual se cultiva.

Los modelos obtenidos y los elevados valores de R2 reportados en la tabla 2 son similares a los informados por Herrera et al. (2017aHerrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017a. "Secondary metabolites of Leucaena leucocephala. Their relationship with some climate elements, different expressions of digestibility and primary metabolites". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (1): 107-116. ISSN: 2079-3480. http://cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/690. b)Herrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017b. "Relation between some climatic factors and the chemical composition of Tithonia diversifolia". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (2): 1-9. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/719., Paumier et al. (2018)Paumier, M., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Leonard, I., Santana, A. & Méndez, Y. 2018. "El contenido de metabolitos primarios de Gliricidia sepium en una zona del Valle del Cauto, Cuba". REDVET Revista Electrónica de Veterinaria. 19(4): 1-8. ISSN 1695-7504. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040418.pdf. y Verdecia et al. (2018)Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Ramírez, J.L., Bodas, R., Leonard, I., Giráldez, F.J., Andrés, S., Santana, A., Méndez-Martínez, Y. & López, S. 2018. "Yield components, chemical characterization and polyphenolic profile of Tithonia diversifolia in Valle del Cauto, Cuba". Cuban Journal of Agricultural Science. 52(4): 457-471. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/838., al evaluar el efecto de la edad y los factores climáticos en el contenido de nitrógeno en especies forrajeras en el Valle del Cauto. Asociaron la disminución del N con la frecuencia de corte debido a la reducción de la síntesis de compuestos proteicos, a la disminución de la cantidad de hojas, aumento de la fracción tallo e incremento de la síntesis de carbohidratos estructurales (celulosa y hemicelulosa) y compuestos fenólicos (lignina).

Otros autores como Torres-Navarrete et al. (2019)Torres-Navarrete, E., Sánchez-Laiño, A., Espinoza-Guerra, I., Barrera-Álvarez, A., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L. & Herrera, R.S. 2019. "Productivity, chemical composition and in situ ruminal degradation kinetics of Morus alba at different regrowth ages". Cuban Journal of Agricultural Science. 53(4): 447-457. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/924., asociaron este comportamiento con la alta proporción de tallos en la muestra, ya que, usualmente, en la literatura se reportan valores de N de aproximadamente 33.6 g/kg MS en las hojas, mientras que en los tallos oscila entre 11.2 y 22 g/kg MS. Generalmente, los valores observados en las plantas analizadas son similares a los de las leguminosas templadas. Los contenidos encontrados, están en el rango establecido por Camacho-Escobar et al. (2020)Camacho-Escobar, M.A., Ramos-Ramos, D.A., Ávila-Serrano, N.Y., Sánchez-Bernal, E.I. & López-Garrido, S.J. 2020. "Las defensas físico-químicas de las plantas y su efecto en la alimentación de los rumiantes". Terra Latinoamericana. 38(2): 443-453. ISSN: 1870-9982. DOI: https://doi.org/10.28940/terra.v38i2.629. para las leguminosas tropicales, confiriéndole importancia a los resultados del presente trabajo.

Por otra parte, Rivera et al. (2018)Rivera, J.E., Chará, J., Gómez-Leyva, J.F., Ruíz, T. & Barahona, R. 2018. "Variabilidad fenotípica y composición fitoquímica de Tithonia diversifolia A. Gray para la producción animal sostenible". Livestock Research for Rural Development. 30 (12): 1-20. ISSN: 2521-9952. plantearon que la T. diversifolia es una planta que se caracteriza por presentar excelente calidad, por su bajo contenido en fibra y buena relación de nutrientes en su follaje, principalmente alto contenido de compuestos nitrogenado en sus primeros estadios vegetativos. Herrera et al. (2020)Herrera, R.S., Verdecia, D.M. & Ramírez, J.L. 2020. "Chemical composition, secondary and primary metabolites of Tithonia diversifolia related to climate". Cuban Journal of Agricultural Science. 54(3): 425-433. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/976. y Paumier et al. (2020)Paumier, M., Méndez-Martínez, Y., Torres, E., Sánchez, A.R., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Santana, A. & Verdecia, D.M. 2020. "Indicators of Yield of Tithonia diversifolia in the Zone of Granma Province, Cuba". Modern Concepts & Developments in Agronomy. 6(4): MCDA. 000645. ISSN: 2637-7659. DOI: https://doi.org/10.31031/MCDA.2020.06.000645., encontraron concentraciones de nitrógeno de 26-46 g/kg de MS, mientras que Verdecia et al. (2021)Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Ramírez, J.L., Leonard, I., Bodas, R., Andrés, S., Giráldez, F.J., Valdés, C., Arceo, Y., Paumier, M., Santana, A., Álvarez, Y., Méndez-Martínez, Y. & López S. 2020b. "Effect of age of regrowth, chemical composition and secondary metabolites on the digestibility of Leucaena leucocephala in the Cauto Valley, Cuba". Agroforestry Systems. 94(4): 1247-1253. ISSN: 0167-4366. DOI: https://doi.org/10.1007/s10457-018-0339-y. notificaron similitudes en cuanto al contenido y variabilidad del nitrógeno de la T. diversifolia y G. sepium, lo que enfatiza la importancia de utilizar la combinación de especies forrajeras leguminosas en la alimentación animal.

La calidad de las arbóreas varía en los diferentes componentes de la biomasa. Las hojas presentan mayores concentraciones de nutrientes que las ramas y los tallos, y esta variación también se ha relacionado con la edad, presentado las hojas jóvenes más contenido de nitrógeno que hojas de edades más prolongadas (Lodoño et al. 2018Londoño, J., Mahecha, L. & Angulo, J. 2018. "Desempeño agronómico y valor nutritivo de Tithonia diversifolia (Hemsl.) A Gray para la alimentación de bovinos". Revista Colombiana de Ciencia Animal. 11(1): 1-13. ISSN: 2027-4297. DOI: https://doi.org/10.24188/recia.v0.n0.2019.693.). Estos resultados coinciden con los notificados para esta especie (Gallego-Castro et al. 2017Gallego-Castro, L.A., Mahecha-Ledesma, L. & Angulo-Arizala, J. 2017. "Calidad nutricional de Tithonia diversifolia Hemsl. A gray bajo tres sistemas de siembra en el trópico alto". Agron. Mesoam. 28(1):213-222. ISBN: 978-607-7953-80-7 DOI: https://doi.org/10.15517/am.v28i1.21671., Cerdas-Ramírez 2018Cerdas-Ramírez, R. 2018. "Extracción de nutrientes y productividad del botón de oro (Tithonia diversifolia) con varias dosis de fertilización nitrogenada". InterSedes. 39(19):172-187. ISBN 3-926446-66-8. DOI: https://doi.org/10.15517/isucr.v19i39. y Rodríguez et al. 2019Rodríguez, R., Galindo, J., Ruiz, T.E., Solis, C., Scull, I. & Gómez, S. 2019. "Valor nutritivo de siete ecotipos de Tithonia diversifolia colectados en la zona oriental de Cuba". Livestock Research for Rural Development. 31(8). ISSN: 2521-9952. http://lrrd.cipav.org.co/lrrd31/8/ruiz31119.html.).

La variabilidad en los azúcares con la edad se debe a la diferenciada capacidad fotosintetizadora de cada especie, relacionado con el contenido de minerales como el potasio, el cual es mediador del metabolismo y del transporte de los carbohidratos primarios en las plantas (Martín 2017Martín, D.A. 2017. "Los compuestos fenólicos: un acercamiento a su biosíntesis, síntesis y actividad biológica". Revista de Investigación Agraria y Ambiental. 9(1):81-104. ISSN: 2145-6453. DOI: https://doi.org/10.22490/21456453.1968.).

El contenido de carbohidratos solubles está ligado al desarrollo morfo-estructural de las plantas. Las reservas concentradas de estos compuestos, en menor cantidad, en los puntos de crecimiento (yemas) favorecen las concentraciones foliares de los sacáridos después de la emisión del rebrote. No obstante, aunque de forma general estos aspectos están descritos, desde el punto de vista fisiológico, el comportamiento de los metabolitos energéticos en función de las variaciones morfológicas depende de la especie, estado nutricional y condiciones edafoclimáticas en la cual se cultiva (Cao et al. 2011Cao, H., Hwang, J. & Chen, X. 2011. "Carbohydrate-containing natural products in medicinal chemistry. Opportunity, challenge and scope of natural products in Medicinal Chemistry". Chem. Inform. 44(23): 411-431. ISSN:1522-2667. DOI: https://doi.org/10.1002/CHIN.201323203.).

Li et al. (2018)Li, M., Li, P., Ma, F., Dandekar, A.M. & Cheng, L. 2018. "Sugar metabolism and accumulation in the fruit of transgenic apple trees with decreased sorbitol synthesis". Horticulture Research. 5(60): 1-11. ISSN 2052-7276. DOI: https://doi.org/10.1038/s41438-018-0064-8. al referirse a la movilización de los carbohidratos plantearon, que el contenido de reserva alcanza su máximo valor en las hojas adultas al principio de la floración y se movilizan durante el desarrollo del fruto pero, observó la rápida disminución de las reservas presentes en raíces y hojas durante la floración, con un aumento transitorio de estos al inicio de la abscisión de los frutos y franca disminución hasta un valor mínimo al final del período de abscisión fisiológica, con lo cual la nutrición del fruto pasa a depender de la fotosíntesis más que de las reservas del árbol. Aspectos que pueden explicar lo ocurrido en esta investigación.

Las fluctuaciones de los carbohidratos no estructurales de la E. variegata a las edades de 60 y 120 días encontradas por Verdecia et al. (2020a)Verdecia, D.M., Herrera, R.S., Ramírez, J.L., Paumier, M., Bodas, R., Andrés, S., Giráldez, F.J., Valdés, C., Arceo, Y., Álvarez, Y., Méndez-Martínez, Y. & López, S. 2020a. "Erythrina variegata quality in the Cauto Valley, Cuba". Agroforestry Systems. 94(4): 1209-1218. ISSN: 0167-4366. DOI: https://doi.org/10.1007/s10457-019-00353-z fueron atribuidas a factores genéticos, condiciones edafoclimáticas, y las técnicas de cultivo utilizadas. La maduración de la planta, las condiciones de transporte y almacenamiento, son importantes a la hora de evaluar el contenido en carbohidratos, si se tiene en cuenta que la fructosa se sintetiza durante las primeras etapas del crecimiento. Las concentraciones de azúcares en Tithonia fueron similares a las obtenidas en el follaje de otras plantas no leguminosas tales como Morus alba, Trichantera gigantea, Cnidoscolum aconitifolium y Ficus carica (García et al. 2008García, D.E., Medina, M.G., Clavero, T., Cova, L.J., Domínguez, C. & Baldizán, A. 2008. "Caracterización nutritiva del follaje de seis especies forrajeras con énfasis en sus perfiles polifenólicos". Revista Científica FCV-LUZ 18(3): 188-196. ISSN: 0798-2259. http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-22592008000200011.). Sin embargo, las cantidades fueron inferiores a lo informado en algunas leguminosas de uso tradicional como forraje (Yang et al. 2018Yang, L., Kui-Shan, W., Xiao, R., Ying-Xian, Z., Feng, W. & Qiang, W. 2018. "Response of Plant Secondary Metabolites to Environmental Factors". Molecules. 23(762): 1-26. ISSN: 1420-3049. DOI: https://doi.org/10.3390/molecules23040762.), en las cuales se ha determinado el valor de estos compuestos en follajes maduros. Esto corrobora lo descrito con anterioridad, donde se explica la intervención de diferentes factores en los contenidos de dichos azúcares.

Al respecto, es conocido que generalmente las no leguminosas comparadas con las leguminosas presentan mayor cantidad foliar de carbohidratos solubles cuando ambos grupos se encuentran en el mismo estado fenológico (Flores-Villa et al. 2020Flores-Villa, E., Sáenz-Galindo, A., Castañeda-Facio, A.O. & Narro-Céspedes, R.I. 2020. "Romero (Rosmarinus officinalis L.): su origen, importancia y generalidades de sus metabolitos secundarios". TIP Revista Especializada en Ciencias Químico-Biológicas. 23: 1-17. ISSN: 2395-8723. DOI: https://doi.org/10.22201/fesz.23958723e.2020.0.266.). Sin embargo, se ha demostrado en diferentes condiciones experimentales, que la edad de la biomasa influye en la concentración de los hidratos de carbono (Guerreiro et al. 2018Guerriero, G., Berni, R., Muñoz-Sanchez, A., Apone, F., Abdel-Salam, E.M., Qahtan, A.A., Alatar, A.A., Cantini, C., Cai, G., Hausman, J.F., Siddiqui, K.S., Hernández-Sotomayor, T. & Faisal, M. 2018. "Production of Plant Secondary Metabolites: Examples, Tips and Suggestions for Biotechnologists". Genes. 9(309):1-15. ISSN: 2073-4425. DOI: https://doi.org/10.3390/genes9060309.).

Salvucci et al. (2010)Salvucci, M.E., Berta, C., Byers, J.A. & Canarini, A. 2010. "Photosynthesis and assimilate partitioning between carbohydrates and isoprenoid products in vegetatively active and dormant guayule: physiological and environmental constraints on rubber accumulation in a semiarid shrub". Physiology Plantarum. 140(4): 368-379. ISSN:1399-3054. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1399-3054.2010.01409.x. al estudiar el contenido de glucosa, fructosa y sacarosa en el follaje de Parthenium argentatum encontraron las mayores concentraciones durante el período de lluvias, debido a la mayor actividad fotosintética y por consiguiente incremento de la formación de carbohidratos. Por su parte, Brueckner et al. (2010)Brueckner, B., Schwarzbach, A. & Schrödter, R. 2010. "Correlation between sugar and saponin contents and sensory attributes of white asparagus". J. Verbr. Lebnsm. 5: 305-311. ISBN 978-607-17-0414-6. DOI: https://doi.org/10.1007/s00003-010-0595-x. hallaron 0.09 - 0.11; 0.15 - 0.16 y 0.03 - 0.04 g/kg MS de glucosa, fructosa y sacarosa, respectivamente valores estos superiores a los registrados en el presente estudio. Esto se puede atribuir a las diferencias en las condiciones experimentales y de especie.

En cuanto a la correlación entre nitrógeno, glucosa, sacarosa y fructosa con la edad y los factores climáticos (table 3), los resultados alcanzados coinciden con los encontrados por Herrera et al. (2017 aHerrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017a. "Secondary metabolites of Leucaena leucocephala. Their relationship with some climate elements, different expressions of digestibility and primary metabolites". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (1): 107-116. ISSN: 2079-3480. http://cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/690. b)Herrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017b. "Relation between some climatic factors and the chemical composition of Tithonia diversifolia". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (2): 1-9. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/719., Paumier et al. (2018)Paumier, M., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., Herrera, R.S., Leonard, I., Santana, A. & Méndez, Y. 2018. "El contenido de metabolitos primarios de Gliricidia sepium en una zona del Valle del Cauto, Cuba". REDVET Revista Electrónica de Veterinaria. 19(4): 1-8. ISSN 1695-7504. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040418.pdf. y Herrera et al. (2020)Herrera, R.S., Verdecia, D.M. & Ramírez, J.L. 2020. "Chemical composition, secondary and primary metabolites of Tithonia diversifolia related to climate". Cuban Journal of Agricultural Science. 54(3): 425-433. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/976. quienes encontraron elevados coeficientes de correlación (r) entre la edad de rebrote, lluvias totales y días con lluvias con el nitrógeno y los azúcares.

En este sentido, Hernández-Espinoza et al. (2020)Hernández-Espinoza, D.F., Lagunes-Espinoza, L.C., López-Herrera, M.A., Ramos-Juárez, J.A., González-Garduño, R. & Oliva-Hernández, J. 2020. Edad de rebrote de Erythrina americana Miller y concentración de compuestos fenólicos en el follaje. Madera y Bosques. 26(1): e2611826. https://doi.org/10.21829/myb.2020.2611826. plantearon que el estrés producido por los factores abióticos afecta la cinética del metabolismo de los carbohidratos, de manera que el balance de los factores ambientales influye en la relación fuente-utilización y, por tanto, la acumulación final de estos compuestos en los órganos de almacenamiento. De ahí, que en el proceso de mejoramiento de las diferentes especies y selección de genotipos se tenga en cuenta que estas puedan soportar las exigencias causadas por las condiciones abióticas adversas, para que, la capacidad de ajuste o tolerancia de las plantas a estas condiciones no sea limitada.

Por su parte, Herrera et al. (2017a)Herrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017a. "Secondary metabolites of Leucaena leucocephala. Their relationship with some climate elements, different expressions of digestibility and primary metabolites". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (1): 107-116. ISSN: 2079-3480. http://cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/690. en esta especie al correlacionar la composición química y las variables climáticas establecieron varias hipótesis: a) todo parece indicar que los cambios en la composición química son menos sensibles a las variaciones de la temperatura; b) es más importante la distribución de las lluvias que el total de ellas en la variabilidad de la composición química. Además, si se comparan estos resultados con los obtenidos en las gramíneas pratenses, así como los alcanzados con la Leucaena son totalmente diferentes (Herrera et al. 2017 bHerrera, R.S., Verdecia, D.M., Ramírez, J.L., García, M. & Cruz, A.M. 2017b. "Relation between some climatic factors and the chemical composition of Tithonia diversifolia". Cuban Journal of Agricultural Science. 51 (2): 1-9. ISSN: 2079-3480. https://www.cjascience.com/index.php/CJAS/article/view/719.), por lo que se pudiera establecer la tercera hipótesis de que existen variaciones en la intensidad y elementos que intervienen en la síntesis de los referidos compuestos. Como hipótesis, estas necesitan de investigaciones específicas que expliquen este comportamiento.

Conclusiones

La edad de rebrote tuvo efecto marcado en los contenidos de metabolitos primarios (nitrógeno, glucosa, fructosa y sacarosa), lo que explican la estrecha relación, a través de las ecuaciones de regresión establecidas. En cuanto a los elementos climáticos la correlación fueron variables al ser marcada durante el período lluvioso, mientras que en el poco lluvioso solo el nitrógeno y la fructosa se relacionaron. Esto sustenta que la mayor variabilidad y movilidad de los principales metabolitos primarios se debe a los procesos fisiológicos del vegetal.